成都SPE柱厂家彪仕奇:普通TLC其的峰容量十分有限,在中药等成分复杂样品的分析过程中显得力不从心,于是,一种更为先进的薄层色谱技术——二维薄层色谱(2D—TLC)应运而生。
二维薄层色谱应当满足两个条件:
1)两个维度的分离机制是相互正交的;
2)在第一维中已被分离开的两个物质在第二维展开的过程中依然是分离的。
2D-TLC在扩充峰容量提高分离效果的基础上,几乎保留了一维色谱的所有优点:采用一次性固定相,样品通常无需净化精制,节约分析成本和时问;结果可视化;所需展开剂量少,节约试剂;固定相和流动相选择范围广;所有斑点贮存在薄层板上,可随时对其重复扫描检测,得出最佳结果。
二维2D-TLC最常用的模式有两种:
1)单固定相二维薄层色谱
单固定相二维薄层色谱 (2D—TLC on one absorbent),即薄层板只有一种固定相涂层。样品在薄层板的一角点状点样,在第一个方向上展开, 晾干之后,旋转90。,在第二个方向上再次展开。为达到较好的分离效果,一般可选择中等极性的固定相,并在两个方向上使用不同的溶剂系统,使两个维度分别为正相展开系统和反相展开系统。当然,理论上也可以在两个维度上都使用相同的展开系统,但这样只是相当于延长了展距,对分离效果并无明显的提升,因此较少被采用。
2) 双固定相二维薄层色谱
双固定相二维薄层色谱 (2D—TLC on bilayer plates),即薄层板铺有两种不同的固定相涂层,一种涂层为一窄条带,薄层板的剩余空间铺满另一种涂层。样品在条带涂层的一端点状点样,在第一个方向上展开,晾干之后,旋转90。在第二种涂层上进行展开。第一维固定相还能起到预浓缩的作用,使第二维展开的条带更细,展开结果更为美观。
双固定相二维色谱也和单固定相二维色谱存在着相同的问题,即两次展开过程之问的干燥问题,但其问题更为严峻,单固定相二维色谱尚可选择将反相系统在第二维展开,但双固定相二维色谱的两个维度已被预制,第一维若为十二烷基硅胶之类的固定相,则只能选择将反相展开系统作为第一维,无法回避控制含水量的问题。
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