色谱级环己烷彪仕奇收集了方法概要:在婴幼儿配方食品和乳粉中加入适量的脂酶,酶解后用NaOH 皂化,用正己烷萃取,蒸干后用正己烷溶解,用高效液相色谱柱后衍生法(HPLC-锌粉还原柱)用荧光检测器定量测定维生素K1。
关键词:婴幼儿配方食品,乳粉,HPLC,锌粉还原柱
方法步骤:
1、试剂和耗材
HPLC级正己烷;无水硫酸钠;
HPLC级甲醇;HPLC 级冰醋酸(乙酸);HPLC级二氯甲烷;维生素K1 标准品。
2、提取
称取约2.5 g(精确到0.1mg)混合均匀的试样于三角瓶中(含淀粉的试样加入0.5g 淀粉酶),用30ml 温水溶解,加入1g 酯酶,于37℃恒温空气震荡器中震荡过夜,使其充分酶解。然后加入2ml 10mol/L氢氧化钠溶液,转移至500ml 的分液漏斗中,加入50ml 乙醇,充分混匀。再加入50ml 正己烷,加塞振摇2min,静置分层。放出下层于另一个500ml 分液漏斗中再次加入50ml 正己烷萃取,静置分层,弃去水相,合并正己烷。加入适量蒸馏水洗有机相两次,弃取水相,将正己烷通过无水硫酸钠过滤到500ml 的平底烧瓶中,在旋转蒸发器上40℃下蒸发至近干,用正己烷转移残留物到10ml 指形瓶中,用氮气吹干,准确加入1ml 正己烷,充分振荡溶解残留物,得到待测液,在冰箱中冷冻一小时后备用。
3、 HPLC 测定方法:
色谱柱、衍生柱:锌粉还原柱,35×4.6mm(LAAA-0001)
流动相:甲醇900ml,二氯甲烷100ml,冰醋酸0.3 ml,氯化锌1.5g,无水乙酸钠0.5g,溶解过0.45滤膜。
进样量:10 μL
流 速:1.0 mL/min
检测波长:荧光检测器:波长EX=243nm EM=430nm
4、结果分析:
分析图谱
VK1 标准溶液色谱图(荧光检测器)0.4ug/ml VK1 标准溶液色谱图(荧光检测器)0.04ug/ml
婴幼儿配方色谱图(荧光检测器)
5、结果分析
儿配方食品中的维生素K1,分离效果良好,峰形对称,重复性好。
色谱级环己烷彪仕奇致力于为客户提供一流的产品和技术服务,推进企业的循环发展!