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延迟体积
我们首先来看对于流动相的影响。
相信绝大多数使用液相的同学都是使用梯度方法,当然也使用泵来在线混合流动相的。我们也知道流动相的比例的改变会改变它的洗脱强度,从而改变样品的出峰时间和分离度。但是,流动相的比例的改变是需要到色谱柱上面才能对分离产生影响的。
这样从流动相混合点开始,到色谱柱的柱头这中间所有的体积,就叫做延迟体积(Delay Volume),因为流动相比例的变化因为这一段体积而被延迟了。
有时候,这个体积也被叫做梯度延迟体积(Gradient Delay Volume)、驻留体积(Dwell Volume),有时候这个Dwell Volume也被翻译成滞留体积,这个是容易让人产生混淆的地方,因为这里的滞留是指的流动相的滞留,稍后我们还会讲到样品的滞留。
空隙体积
接下来是体积对于样品的影响。
大家都知道,样品一旦进入了液相系统,被流动相带着往前运动的过程中,自身也会因为热力学运动产生扩散,所以在等度液相的条件下,越往后出的峰,峰宽一般都越宽。
一般来说,样品由自动进样器引入系统,可能经过了自动进样器内部的一些管路后,通过进样器到柱温箱的色谱柱。色谱柱的体积包括了填料的体积、以及填料间空隙的体积。
一般对于多孔硅胶填料的色谱柱来说,填料之间的体积占到了色谱整体体积的60%左右。我们一般把这部分叫做色谱柱的空体积/空隙体积(Column Void Volume)或者填料间体积(Interparticle Volume)。
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