甲醇哪家好?彪仕奇告诉您实验里常用的乙腈和甲醇在色谱分析中的区别,乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以,除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外,色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。
紫外线吸光度
对于HPLC级溶剂(我们在HPLC分析中应始终使用HPLC级溶液),乙腈的吸光度在这两种溶剂中最低,非常适合低紫外光分析。甲醇在205-210nm左右有较高的紫外光吸收值,在非常低的紫外光范围内略有限制。
溶剂溶解性
乙腈和甲醇在溶解多种缓冲盐和样品的能力上存在显著差异。这些差异在方法开发中至关重要。
1.流动相溶解度
梯度运行显示低重现性或失败的一个常见原因可能与运行高浓度缓冲液和高浓度有机溶液有关。而含有浓度小于10mM盐溶液的水溶液/有机溶液在大多数梯度条件下不太可能沉淀(最多98%是有机溶剂,而不是100%),大多数与高效液相色谱应用一起使用的缓冲溶液会有更高的盐浓度,当分析条件中有机溶剂含量较高时可能会从溶液中析出(导致堵塞,泄漏,插头和不准确的结果)。在反向色谱法中选择有机组成时要谨慎。确保使用的溶液在所有浓度下都是稳定的。还要验证缓冲能力是否仍然存在,当使用高有机浓度时(当缓冲液被稀释时)。
甲醇总体上具有更好的溶解度特性(优于乙腈),这意味着它在较高浓度下能更好地溶解大多数盐,从而获得更好的性能和更少的沉淀。
2.样品的溶解度(对峰形和保留的影响)
液相色谱的一个基本要求是样品完全溶解在流动相(初始流动相)中。在分析前,将样品溶解在流动相或强度稍弱的溶液(不是更强的溶液)。这确保它将作为一个集中的段塞加载到柱的顶部,以改善峰形和RSD。如果样品没有完全溶解在流动相,那么你实际上并没有分析整个样品。甲醇优于乙腈的另一个方面是它能完全溶解更多类型的样品。这一改进的溶解度可能导致更好的整体峰形。甲醇的选择性也不同于乙腈(不仅仅是洗脱强度),这可能导致峰洗脱时间与预期的保留时间不同。这也是为什么在开发反向方法时,我们总是尝试使用含有乙腈或甲醇的不同流动相混合物的另一个原因。
背压
乙腈的粘性比甲醇小,因此通常会导致整体柱压和系统背压降低。乙腈和水的混合物也会发生吸热反应(冷却溶液),从而在溶液中捕获气体。如果你预先混合你的流动相,让它静置几分钟后在制备。
希望这篇关于这两种常用高效液相色谱溶剂的差异的简短讨论将有助于您开发出更好的高效液相色谱和LC-MS方法。