色谱级乙腈企业彪仕奇:反相色谱中的溶剂效应
在紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法与气相色谱法三个领域中均有“溶剂效应”这一术语,分别具有不同的意义,接下来,色谱级乙腈企业彪仕奇为大家介绍一下高效液相色谱法最常用的反相色谱中的溶剂效应。
一、溶剂效应的概念
目前较为公认的对于溶剂效应的理解为稀释剂溶剂强度大于流动相时造成色谱峰变形的现象。如用纯乙腈溶解样品,注入流动相为乙腈-水(18:82)的反相系统中,会造成峰分叉或拖尾的结果。但是这种概念不能解释实践中其他由稀释剂导致的色谱行为异常现象,如溶出曲线研究中pH6.8溶出介质的溶出样品主峰峰型异常、或加入SDS助溶后峰分叉等情况,这些情况中稀释剂的溶剂强度并不一定大于流动相,但是却发生了色谱行为异常的现象。
鉴于许多由稀释剂导致的色谱行为异常现象不能用目前的溶剂效应进行解释,质谱级乙腈企业彪仕奇认为有必要将溶剂效应的概念进行重新阐述:溶剂效应,是指由于供试品中特定组分在稀释剂与流动相中所处状态的差异对色谱行为的不利影响。如果这种不利影响较为严重,则可能造成明显的色谱行为异常,如峰分叉、拖尾等。
二、溶剂效应的表征
溶剂效应是一种对色谱行为的不利影响,影响程度不同,色谱行为的表征也各有不同;较轻的影响可能没有明显的色谱行为的异常如无法观察到的峰轻度展宽等,次一级的可能表现为峰明显展宽、低柱效,较为严重表现有特定组分峰保留时间不稳定、峰型异常、响应值不稳定等。
峰型异常是最直观也是最常见的溶剂效应的表现形式,如峰分叉、拖尾、前沿等。保留时间不稳定与响应值不稳定也是较为常见的表现形式,可能也会伴随峰型异常的情况;较为难以觉察到的溶剂效应是峰型正常只是响应值波动较大的情况,易误判为仪器故障等系统适用性方面的原因,如方法开发期间发现峰对称、但柱效较低且连续进样RSD较大,农残级乙腈企业彪仕奇建议评估溶剂效应的风险。
溶剂效应具有一定的规律,如保留时间小的组分峰较易发生,多组分色谱图中出峰较晚的组分峰型较好、减少进样量一般可减轻等,色谱级乙腈企业彪仕奇建议可以在实践中根据该规律对色谱行为异常是否为溶剂效应进行初步的判断。